ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit

 

Produktnamn	Katt. Inga.	Spec.
ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit	G1612-100T	10 ml
	G1612-1000T	100 ml

 

 

ATP är en viktig energimolekyl i cellen som spelar en viktig roll i olika fysiologiska och biokemiska aktiviteter i cellen, och är känd som energivalutan i organismen. Det cellulära tillståndet och antalet celler visar en korrelation med ATP. Därför kan cellantal eller livsduglighet bedömas genom den relativa nivån av ATP.

Detta kit är baserat på principen att ATP-beroende luciferas katalyserar luciferin för att producera fluorescens, som effektivt kan detektera och utvärdera den intracellulära ATP-nivån. Jämfört med de traditionella metoderna som CCK-8 och MTT har fluorescensmetoden fördelarna med hög känslighet och brett räckvidd.

 

 

Fartyg med torris; Förvara i -80 grad borta från ljus i 12 månader; Förvaras i -20 grad borta från ljus, rekommenderas för användning inom 6 månader.

 

 

Komponent	G1612-100T	G1612-1000T
ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit	10 ml	100 ml
Manuell	1 st

 

 

1. Cellförbehandlingsarbete:Inokulera cellerna med en viss densitet i en 96-brunnsplatta (välj en vit ogenomskinlig brunnsplatta lämplig för cellodling eller använd en vanlig cellodlingsplatta. När du utför detektionen, överför lösningen till de vita detektionsbrunnarna till minimera interferens mellan intilliggande brunnar.) och förbehandla cellerna enligt syftet med experimentet;

2. Provförberedelse för ATP-standarder (valfritt):ATP-standarden (fristående) späds gradvis ut med buffert som PBS eller basalt medium och läggs till brunnsplattan med 100 μL/brunn;

3. Cellviabilitetsanalys:

3.1. Ta ut ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagens i förväg, tina det och återställ det till rumstemperatur;

3.2. Ta bort cellodlingsplattan och jämvikta vid rumstemperatur i 5-10 min;

3.3. ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagens tillsätts direkt till brunnsplattan med 100 μL/brunn;

3.4. Skaka horisontellt i 1-2 min eller tryck för att blanda;

3.5. Efter att ha stått i 3 minuter kan kemiluminescensanalysen utföras med en Luminometer, en multifunktionell enzymmärkning med en kemiluminescensdetektionsmodul eller andra instrument som kan detektera bioluminescens (observera: provet i sig avger inte ljus i fluorescensmetoden, men behöver att exciteras av en specifik våglängd av excitationsljus och sedan tas emot genom en speciell kanal.In kemiluminescens, provet självt avger ljus och behöver inte exciteras av en specifik våglängd av excitationsljus för att kunna detekteras av motsvarande utrustning);

4. Dataanalys:Följande dataanalys baseras på att subtrahera bakgrundsblanketten

4.1. Analys av relativ cellantal (proliferation): Bestäm antalet celler enligt fluorescensintensitetsvärdet.

4.2. Cellviabilitetsberäkning (cellproliferationviabilitet eller cytotoxicitetviabilitet):

Notera:

A (doseringsgrupp): behandlade celler + ATP-luminescenscellviabilitetsanalysreagens

A1 (ingen doseringsgrupp): normala obehandlade celler + ATP-luminescenscellviabilitetsanalysreagens

A0 (blank kontrollgrupp): cellodlingsmedium (inga celler) + ATP-luminescenscellviabilitetsanalysreagens

4.3. Kvantitativ analys av ATP-innehåll (valfritt):

4.3.1. Fluorescensintensitetsvärdet för den detekterade ATP-standardkurvan subtraheras från fluorescensintensitetsvärdedata för den tomma kontrollgruppen, och standardkurvan plottas med hjälp av programvara som Excel, och formeln erhålls:

där a representerar lutningen och b representerar skärningen.

4.3.2. X-värdet (ATP-innehåll) i analyssystemet beräknas enligt formeln:

Beräkna värdet på Y genom att ersätta lutningen a och skärningspunkten b från 4.3.1 i ekvationen ovan.

4.3.3. Beräkning av ATP-innehåll i prover:

 

1. För att säkerställa att testreagenset används effektivt, rekommenderas det att förvaras i små portioner och undvika upprepad frysning och upptining.

2. Testtidsförskjutningen kontrolleras inom 5-30 min för att säkerställa att testdatan är korrekt.

3. En del av reagensutfällningen efter upptining är ett normalt fenomen, skakas fullständigt före användning för att säkerställa fullständig upplösning.

4. Försök att undvika ljus och tillsätt testreagenserna inom en kort tidsperiod. Det rekommenderas att använda en flerbrunnspipett för att lägga till prover och vara uppmärksam på konsistensen av pipetteringvolymen i varje brunn i pipetten.

5. För din hälsa och säkerhet, vänligen bär labbrock och handskar under drift.

 

Endast för forskning!

 

 

Populära Taggar: atp luminescens cell viabilitet analys kit, Kina atp luminescens cell viabilitet analys kit tillverkare, leverantörer, fabrik