Ettstegs Rapid Mycoplasma Detection Kit (isotermisk amplifieringsmetod)

Satsen kan snabbt upptäcka åtta sorters mykoplasma i cellodlingsmedium genom isotermisk amplifieringsteknik och visuell färgförändring. Utan DNA-extraktion tillsattes 1 μL cellkultursupernatant direkt till reaktionslösningen och 30 minuter reagerades vid 65 grader. Färgen på det positiva provet ändrades från gult till rött, och hela processen behöver inte PCR-instrument eller öppet lock för elektrofores, vilket effektivt kan undvika korskontaminering orsakad av aerosol. Jämfört med den traditionella PCR-metoden har denna produkt fördelarna med enkel drift, hög känslighet och kan tolerera en mängd olika PCR-hämmare i odlingsmediet, så det finns inget falskt negativt fenomen, och detektionsresultaten är mycket överensstämmande med qPCR.

Skickas med våt is och förvaras vid -20 grader ; gäller i upp till 12 månader.

a: Innehåller kromogena ämnen.

Innan du börjar (läs noga)

Sätt upp 65 graders vattenbad eller metallvärmeblock i förväg.

1. Provberedning som ska testas:

a. Vidhäftande celler: Absorbera supernatanten direkt. Det föreslås att proverna ska tas när cellympningen eller vätskebytet är mer än 3 dagar och konfluensgraden är cirka 90 %. Vid denna tidpunkt är innehållet av mykoplasma i supernatanten högt och kan lätt detekteras.

b. Suspensionsceller: Supernatanten erhölls efter centrifugering vid 1,000 rpm under 5 min. Det föreslås att proverna ska tas efter cellympning eller vätskebyte i mer än 3 dagar, då innehållet av mykoplasma i cellodlingsmediet är högt och lätt kan detekteras.

2. Reaktionssystem

a: Mycored Buffer används upp och ner efter upptining.

b: Beroende på antalet prover, efter att ovanstående reaktionssystem har förberetts, subpacka det i reaktionsröret, tillsätt 20 μL paraffinolja och fortsätt sedan till nästa steg.

3. Lägg till prover

a. Negativ kontroll: Inget prov sattes till det första reaktionsröret som en negativ kontroll.

b. Positiv kontroll: 1 μL positiv kontroll sattes till det sista reaktionsröret som positiv kontroll.

c. Prov som ska testas: Tillsätt 1 μL cellkultursupernatant till resten av reaktionsröret.

a: Förläng pipettspetsarnas huvud under vätskenivån av paraffinolja för att lägga till prover.

4. Reaktionstillstånd

Överför reaktionsröret till ett förvärmt 65 graders vattenbad eller metallbad för att inkubera 30 min. Om färgutvecklingen inte är tydlig kan reaktionstiden förlängas till 40 min.

Ta ut reaktionsröret omedelbart efter slutet av reaktionen, och om reaktionslösningen fortfarande är gul efter att den återställts till rumstemperatur, blir resultatet negativt. Om reaktionslösningen blir röd är resultatet positivt. Reaktionsröret bör inte öppnas, annars leder det lätt till aerosolföroreningar.

1. Öppna inte reaktionsröret efter att reaktionen är över.

2. Det föreslås att pipettspetsarna med filterelement ska användas i processen för att bereda reaktionslösningen och att de kasserade pipettspetsarna och reaktionsröret ska läggas i den självförslutande påsen och hanteras i tid.

3. Använd nukleinsyrarenare (rekommenderas G3020) för att torka av testbänken och pipettera ofta.

Endast för forskning!

Populära Taggar: ettstegs snabb mykoplasmadetektionskit (isotermisk amplifieringsmetod), Kina ettstegs snabb mykoplasmadetektionskit (isotermisk amplifieringsmetod) tillverkare, leverantörer, fabrik