Produktintroduktion
|
Produktnamn |
Katt. Inga. |
Spec. |
|
SweScript All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (One-Step gDNA Remover) |
G3337-50 |
50 rxns |
|
G3337-100 |
100 rxns |
Produktbeskrivning/Introduktion
SweScript All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Remover) innehåller 5×klar att använda mastermix (5×SweScript All-in-One SuperMix för qPCR) utvecklad specifikt för första strängen cDNA-syntes och gDNA-borttagningsreagens, som tar bort återstående genomiska rester från mallen medan den omvända transkriptionsreaktionen är utförs. Kitet innehåller 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix som en omvänt transkriptasfri kontroll för att avgöra om qPCR-mallen härrör från cDNA. Mastermixen innehåller alla reagenser som krävs för den omvända transkriptionsreaktionen (SweScript RT, RNase Inhibitor, Random Primer, Oligo(dT)18 Primer, dNTPs och det optimerade buffertsystemet). SweScript RT är ett mutant omvänt transkriptas som erhålls genom in vitro evolutionär screening och kännetecknas av hög termisk stabilitet och ihållande syntes. gDNA Remover innehåller ett värmekänsligt DNas som är 30-faldigt mer aktivt än DNas I och verkar endast på dsDNA och är känsligt för inaktivering under höga temperaturer.
Förvarings- och leveransvillkor
Fartyg med våt is; Förvaras i -20 grad , giltigt i 12 månader.
Produktinnehåll
|
Komponentnummer |
Komponent |
G3333-50 |
G3333-100 |
|
G3337-1 |
5×SweScript Allt-i-ett SuperMix för qPCR |
200 ul |
400 μL |
|
G3337-2 |
gDNA Remover |
50 μL |
100 μL |
|
G3337-3 |
Nukleasfritt vatten |
1 ml |
1 ml |
|
G3337-4 |
5×SweScript Allt-i-ett No-RT Control SuperMix för qPCR |
20 μL |
40 μL |
|
Manuell |
Ett exemplar |
Ett exemplar |
|
Analysprotokoll/procedurer
1. Första-strängs cDNA-syntes och gDNA-borttagning
1. Förberedelse av reaktionssystem (20 μL reaktionssystem rekommenderas):
|
Komponent |
Volym |
|
5×SweScript Allt-i-ett SuperMix för qPCR |
4 μL |
|
gDNA Remover |
1 μL |
|
Totalt RNA/mRNA |
0.1 ng-5ug / 10 pg-0.5ug |
|
Nukleasfritt vatten |
Tillsätt till 20 μL |
2. Blanda försiktigt och centrifugera;
3. Utför omvänd transkription med de rekommenderade termiska förhållandena nedan:
|
Temperatur |
Tid |
|
25 grader |
5 min |
|
42 grader |
15-30 min |
|
85 grader |
5 sek |
Notera
1. Använd engångshandskar vid hantering för att undvika RNase-kontamination.
2. Se till att placera 5×SweScript All-in-One SuperMix, 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix, gDNA Remover på is.
3. 5×SweScript SuperMix, 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix, gDNA Remover innehåller höga koncentrationer av glycerol och bör centrifugeras kort före användning.
4. För hög GC eller komplexa mallar kan RNA-mallen, nukleasfritt vatten förblandas och hållas vid 65 grader i 5 minuter och sedan snabbt kylas på is. Tillsätt sedan andra reaktionskomponenter.
5. Om en negativ kontroll krävs, byt bara ut samma volym av G3337-1 5×SweScript All-in-One SuperMix för qPCR i reaktionssystemet med G3337-4 5×SweScript All-in-One No -RT Control SuperMix för qPCR.
6. Produkterna för omvänd transkription kan lagras i -20 grad under en kort tid. Om långtidsförvaring behövs, rekommenderas det att förvara dem i -80 grad efter packning för att undvika upprepade frys-upptiningscykler.
7. Om de efterföljande qPCR-primrarna designas över exoner kan steget för borttagning av genomet utelämnas.
Endast för forskning!
Populära Taggar: swescript allt-i-ett rt supermix för qpcr (enstegs gdna remover), Kina swescript allt-i-ett rt supermix för qpcr (one-step gdna remover) tillverkare, leverantörer, fabrik
