Vätskeväteperoxidfärgningsvätska (DAB)

Växtvävnader producerar en mängd olika reaktiva syrearter (ROS) under stressförhållanden. ROS-aktiviteten är mycket stor och extremt instabil, så upptäckten av ROS beror vanligtvis på dess slutprodukter. Väteperoxid är en typ av reaktiva syreämnen. Katalyserad av katalas kan väteperoxid snabbt reagera med DAB (3, 3-diaminobensidintetrahydroklorid) för att bilda en brunröd förening, för att lokalisera väteperoxid i vävnader. Enligt grundprincipen kallas det även för DAB-metoden. Baserat på ovanstående princip används denna produkt för väteperoxidfärgning i levande växtvävnader. Det appliceras vanligtvis på de ömma rotspetsarna, bladen och andra övergripande färgningar, efter färgning är platsen för väteperoxidansamling brun till mörkbrun.

Transport av våt is; Förvara vid 2-8 grad , giltigt i 12 månader.

1. Reagensberedning: 100 mg DAB löstes helt i 100 ml fosfatbuffert för att erhålla DAB-färgande arbetslösning, som förvarades vid 4 grader under ljus och effektiv inom en vecka. Obs: DAB är känsligt för ljus och måste skyddas från ljus under upplösningsprocessen. Om det är svårt att lösa upp kan upplösningen främjas genom ultraljuds- och magnetomrörning.

2. Samla plantor eller rotspetsar från växter under stress (som tungmetaller), tvätta dem lätt med rent vatten och lägg dem på filterpapper för att tömma överflödigt vatten. Plantplantor eller rotspetsar nedsänktes i DAB-färgande färglösning vid rumstemperatur och hölls borta från ljus i 2-6 timmar tills den positiva delen såg mörkbrun ut och resten var nästan färglösa eller visade växtens färg sig. (Justera färgningstiden efter graden av ungdom och färgutveckling av växter)

3. Ta försiktigt bort plantorna eller bladen med en pincett, doppa dem i rent vatten och skölj dem fram och tillbaka 3-5 gånger, lägg dem på filterpapper för att torka bort överflödigt vatten och doppa dem sedan i 95 % etanol vid 40 grader i 3-16 timmar. Syftet är att ta bort klorofyllet från själva plantorna eller bladen, och den färska 95% etanolen kan bytas ut många gånger under avfärgningen.

4. Ta ut plantor eller blad med pincett, doppa dem i rent vatten och skölj dem fram och tillbaka 3-5 gånger, lägg dem på filterpapper för att torka ut överflödigt vatten, överför proverna till en lämplig mängd DAB-prov konserveringslösning och blötlägg dem i 30 minuter och ta sedan bilder. Prover kan förvaras i lösningen vid rumstemperatur i en vecka.

1. Efter att DAB-färgningsarbetslösningen har preparerats ska den förvaras vid 4 grader och hållas borta från ljus och användas inom en vecka. Lagringstiden är för lång, kommer att påverka färgen.

2. Eftersom väteperoxid är lätt att sönderdela och alla yttre faktorer kan stimulera växtstress att producera väteperoxid, måste växtprover samlas in färska och färgas så snart som möjligt. Negativ och positiv blank kontrollgrupp rekommenderas.

3. Ta bilder så snart som möjligt för att spara resultaten efter provfärgning.

4. Bär en labbrock och engångshandskar under drift.

Endast för forskning!

Populära Taggar: växtväteperoxidfärgningsvätska (dab), Kina växtväteperoxidfärgningsvätska (dab) tillverkare, leverantörer, fabrik